PCR의응용
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작성일 23-01-13 10:18
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레포트/공학기술
다. 그것은 dNTP 와 Mg++ 농도를 내리고 annealing 온도를 높이게 되면 105 염기당 1개까지 改善된다는 보고가 있따 최근, 3` - 5` exonuclease 활성을 가진 내열성 DNA polymerase인 Vent (Thermococcus litoraais) 나 Pfu(Pyrococcus furiosus)가 분리되어 DNA polymerase에 의한…(skip)
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그럼 reference(자료)를 받으시는 모든 분들께 언제나 행복이 가득하시길 바랍니다^^
부족하지만 최선을 다해 작성하고자 노력하였으니 만족하실 수 있으리라 생각됩니다. 따라서 反應(반응)조건에 의해서 읽기 잘못을 일으키는 빈도가 높아지며 잘못된 결론에 도달할 우려가 있따 통상의 反應(반응)조건으로 증폭한 PCR 산물을 subcloning 해서 염기 배열을 해석하면 1 cycle에 대상으로하여 104염기당 1개의 비율로 잘못 읽기(misreading)를 일으킨다.
1) 내열성 DNA polymerase와 反應(반응)조건
현재 가장 널리 사용되고 있는 것은 Thermus aquaticus라는 내열성 균에서 분리된 Taq DNA polymerase이다. 그러나 反應(반응)조건은 복잡하여 조건의 설정이 어렵다.
Ⅰ. 서 론························
1. PCR(Polymerase Chain Reaction)·············
2. PCR기계의 종류·····················
Ⅱ. 본 론························
1. PCR의 원리·······················
2. PCR의 구성시약과 反應(반응)조건···············
1) 내열성 DNA polymerase와 反應(반응)조건···········
2) primer·························
3) PCR cycle·······················
3. PCR의 反應(반응) 특이성···················
4. PCR 생성물의 혼입 위험성················
5. PCR의 응용·······················
1) 비대칭 PCR에 의한 직접 염기 서열 결정법········
2) 경합 PCR에 의한 mRNA 정량··············
3) RACE법························
4) O-157의 검출·····················
5) PCR을 이용한 병원성 효모의 빠른 동정법········
6) Pathogen의 검출····················
7) Human genetics····················
8) Evolutionary biology··················
9) Genetic fingerprinting··················
10) PCR에 의한 닭고기 중 Listeria monocytogenes의 직접 검색··
11) PCR에 의한 한국인 혈우병 A 환자의 유전자내 BclⅠ 및 XbaⅠ RFLP양상에 관한 연구··············
12) 그 밖의 응용분야···················
6. RT-PCR························
1) RT-PCR법의 원리···················
2) RT-PCR법에 따른 實驗예················
Ⅲ. 결 론························
Ⅳ. 출처························
2. PCR의 구성시약과 反應(반응)조건
PCR은 원리가 단순하고 조작이 간편한 DNA증폭법이며, 사용하는 시약도 단순한 편이다. 통상 0.5 - 2.5mmol/l의 농도 범위로 사용된다 deoxynucleotide triphosphate(dNTP)는 20 - 200 mmol/l의 농도로 사용되지만, 그 이상의 고농도는 Taq DNA polymerase가 DNA 서열을 잘못 읽는 原因이 된다 Taq DNA polymerase는 잘못 들어온 염기를 올바른 배열로 고치는 3` - 5` exonuclease 활성을 가지지 않는다.그럼 자료를 받으시는 모든 분들께 언제나 행복이 가득하시길 바랍니다^^PCR의응용 , PCR의응용공학기술레포트 ,
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부족하지만 최선을 다해 작성하고자 노력하였으니 만족하실 수 있으리라 생각됩니다. PCR에서는 1 - 2.5단위(unit)가 사용된다 활성의 발현에는 Mg2+가 필요하고, primer나 deoxynucleotide가 효소에 결합할 때 작용하며, 그 농도는 PCR의 특이성에 큰 effect을 미친다. 이 효소는 pH 8.3 - 8.8, 온도 70℃-75℃ 정도에서 가장 잘 작용하며 94℃ 에서 40분 정도 유지해도 50%의 잔존활성을 나타낸다.
